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如何預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)體系發(fā)生真菌污染?

更新時(shí)間:2024-08-04  |  點(diǎn)擊率:1010

真菌污染會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞代謝、生長(zhǎng)和活力,并降低轉(zhuǎn)染效率,從而影響結(jié)果的可重復(fù)性。

真菌污染的主要來(lái)源是通過(guò)空氣傳播途徑、非無(wú)菌設(shè)備和試劑,或不良的無(wú)菌技術(shù)。真菌主要以懸浮液的形式在培養(yǎng)基中生長(zhǎng),但也可以附著在細(xì)胞或生長(zhǎng)血管上。在顯微鏡下,它們可以被識(shí)別為培養(yǎng)基表面的小孤立菌落,并通過(guò)延長(zhǎng)生長(zhǎng)導(dǎo)致培養(yǎng)基渾濁。在污染的晚期階段,真菌可能會(huì)增加細(xì)胞培養(yǎng)基的 pH 值,導(dǎo)致含酚紅的培養(yǎng)基看起來(lái)色調(diào)較淺。

 

真菌污染的具體表現(xiàn):

培養(yǎng)液變化:培養(yǎng)細(xì)胞受真菌污染后,培養(yǎng)液中可能會(huì)漂浮著白色或淺黃色的小點(diǎn),有的呈散在生長(zhǎng)。這些真菌污染在初期可能不會(huì)引起培養(yǎng)液的明顯混濁,但隨著時(shí)間推移,污染可能逐漸加重。

鏡下觀察:在倒置顯微鏡下,可以觀察到絲狀、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯(cuò)在細(xì)胞之間或培養(yǎng)基中,有的呈鏈狀排列。對(duì)于念珠菌和酵母菌等真菌,它們可能呈卵圓形態(tài),散在于細(xì)胞周邊和細(xì)胞之間生長(zhǎng)。

 

一般遇到細(xì)胞被真菌污染的情況,我們建議直接將細(xì)胞丟棄,并對(duì)培養(yǎng)環(huán)境進(jìn)行清潔消毒。如果遇到真菌污染早期,且不能隨意丟棄細(xì)胞的情況,建議使用細(xì)胞專用的真菌清除試劑,例如:德國(guó)MB公司生產(chǎn)的 Funox®,該真菌祛除試劑并專門設(shè)計(jì)用于預(yù)防并清除真菌感染。它由納他霉素組成,納他霉素是一種由納塔氏鏈霉菌生產(chǎn)的多烯抗真菌抗生素。納他霉素的抗真菌活性取決于它們與各種真菌的細(xì)胞膜甾醇的結(jié)合。

 

Funox®優(yōu)勢(shì):

1、特異性強(qiáng)

Funox® 是一種用于培養(yǎng)基的添加劑,其中含有納他霉素,納他霉素是一種天然存在的抗菌劑,可保護(hù)細(xì)胞培養(yǎng)物免受各種常見(jiàn)真菌和酵母污染物的侵害。

 

2、應(yīng)用范圍廣

Funox® 可用于長(zhǎng)期用于細(xì)胞培養(yǎng),也可用于預(yù)防新鮮制備的原代細(xì)胞培養(yǎng)物中的污染。

 

3、無(wú)細(xì)胞毒性

到目前為止,按照說(shuō)明書使用該產(chǎn)品,尚未報(bào)告對(duì)各種細(xì)胞系的細(xì)胞毒性作用。

 

4、簡(jiǎn)單易用

Funox® 可以直接添加到細(xì)胞培養(yǎng)物的大多數(shù)燒瓶或板中,優(yōu)選在更換培養(yǎng)基時(shí)或傳代細(xì)胞后

 

5、穩(wěn)定性

Funox®應(yīng)在37°C孵育7天后換新,以達(dá)到最大的保護(hù)。

 

6、推薦用途

Funox® 適用于研究和工業(yè)中,用于細(xì)胞培養(yǎng)物和生物制品的直接測(cè)試。不建議用于臨床診斷。需要注意的是,我們建議在污染晚期階段的情況下丟棄細(xì)胞培養(yǎng)物。

 


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