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你知道細(xì)胞培養(yǎng)都需要哪些條件嗎?

更新時間:2022-02-10  |  點擊率:988

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指的是細(xì)胞在體外條件下的生長,在培養(yǎng)的過程中細(xì)胞不再形成組織(動物)。培養(yǎng)物是單個細(xì)胞或細(xì)胞群。細(xì)胞在培養(yǎng)時都要生活在人工環(huán)境中,由于環(huán)境的改變,細(xì)胞的移動或受一些其他因素的影響,培養(yǎng)時間加長,傳代導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)單一化型。


你知道細(xì)胞培養(yǎng)都需要哪些條件嗎?

1、合適的細(xì)胞培養(yǎng)基
合適的細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長增殖的重要的條件之一,培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞生長增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。
2、血清
目前,大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中重要的成分之一,含有細(xì)胞生長所需的多種生長因子及其它營養(yǎng)成分。
3、無菌無毒細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境
無菌無毒的操作環(huán)境和培養(yǎng)環(huán)境是保證細(xì)胞在體外培養(yǎng)成功的首要條件。
在體外培養(yǎng)的細(xì)胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物質(zhì)污染,或者自身代謝物質(zhì)積累,可導(dǎo)致細(xì)胞中毒死亡。因此,在體外培養(yǎng)細(xì)胞時,必須保持細(xì)胞生存環(huán)境無菌無毒,及時清除細(xì)胞代謝產(chǎn)物。
4、恒定的細(xì)胞生長溫度
維持培養(yǎng)細(xì)胞旺盛生長,必須有恒定而適宜的溫度。不同種類的細(xì)胞對培養(yǎng)溫度要求也不同,人體細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)溫度為36。5℃±0。5℃,偏離這一溫度范圍,細(xì)胞的正常代謝會受到影響,甚至死亡。
培養(yǎng)細(xì)胞對低溫的耐受力較對高溫強(qiáng),溫度上升不超過39℃時,細(xì)胞代謝與溫度成正比;人體細(xì)胞在39-40℃1小時,即能受到一定損傷,但仍有可能恢復(fù);在40-41℃1小時,細(xì)胞會普遍受到損傷,僅小半數(shù)有可能恢復(fù);41-42℃1小時,細(xì)胞受到嚴(yán)重?fù)p傷,大部分細(xì)胞死亡,個別細(xì)胞仍有恢復(fù)可能;當(dāng)溫度在43℃以上1小時,細(xì)胞全部死亡。
相反,溫度不低于0℃時,對細(xì)胞代謝雖有影響,但并無傷害作用;把細(xì)胞放入25-35℃時,細(xì)胞仍能生存和生長,但速度減慢;放在4℃數(shù)小時后,再回到37℃培養(yǎng),細(xì)胞仍能繼續(xù)生長。細(xì)胞代謝隨溫度降低而減慢。當(dāng)溫度降至冰點以下時,細(xì)胞可因胞質(zhì)結(jié)冰受損而死亡。
但是,如果向培養(yǎng)液中加入一定量的冷凍保護(hù)劑(二甲亞砜或甘油),可在深低溫下如-80℃或-196℃(液氮)長期保存。
5、合適的氣體環(huán)境
氣體是哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)生存必需條件之一,所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。


科研實驗中,細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian®特級胎牛血清,它適合各種細(xì)胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞,如:干細(xì)胞、肝細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等。


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