自拍偷拍一区二区三区,操丝袜丰臀熟女,男女操b做爱视频,熟妇乱精品一区

當前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  為什么細胞養(yǎng)不好?你知道哪些養(yǎng)細胞的技巧?

為什么細胞養(yǎng)不好?你知道哪些養(yǎng)細胞的技巧?

更新時間:2021-05-17  |  點擊率:2224

在我們實驗中,養(yǎng)細胞是所有實驗的基礎(chǔ),腫瘤細胞培養(yǎng)過程中,總會遇到這樣那樣的麻煩,以下幾種情況,你是否遇到,如何解決,大師兄給你指明一二三。

如何判斷細胞污染了?

狀態(tài) 1: 細胞培養(yǎng)液變渾濁了,經(jīng)常見到是米湯樣,黃色液體,一般認為細菌污染。

 

狀態(tài) 2:細胞培養(yǎng)基內(nèi)含有能動的小黑點,一般認為是黑膠蟲。

 

狀態(tài) 3:胞培養(yǎng)基清亮,但是能看到飄在培養(yǎng)液帶有毛毛的白色的菌狀物質(zhì),有可能就是真菌感染。

 

策略:細胞污染了就直接扔了,還得把培養(yǎng)箱用酒精棉球擦干凈,并用紫外照射半小時,防止再次污染。同時建議細胞培養(yǎng)時,在培養(yǎng)基中加入青鏈霉素 (尤其是初學(xué)者)

細胞培養(yǎng)過程中,細胞周圍包括細胞上有很多小黑點,怎么辦?

 

策略 1:用胰酶消化下來后,低速短時間離心,不同實驗室不一樣,如果平時是 1 000 轉(zhuǎn) 5 min 的話,就可以改為 700 轉(zhuǎn) 3 min,用新的培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細胞,細胞收集是少一點,但是一般都能干凈很多。多傳幾代就好多了。

策略 2:如果多次嘗試之后還是不干凈,就懷疑是否存在支原體污染了,用抗支原體藥就 OK 了。一般用上 3~5 天,細胞就干干凈凈了。

細胞培養(yǎng)過程中,發(fā)現(xiàn)貼壁細胞表面沾了很多死細胞,傳代過程中一直存在怎么破?

為什么細胞養(yǎng)不好?你知道哪些養(yǎng)細胞的技巧?

 

有一招屢試不爽,那就是用 PBS 洗兩遍之后,加胰酶進去,晃一晃,迅速將胰酶倒出,再用 PBS 洗一下,再加胰酶正常消化。死細胞由于粘附能力很弱,第一次加胰酶進去以后會掉下來,第二次加胰酶下來的細胞才是活性比較強的細胞。整完一次之后,再次傳代方法同上,一般 2~3 次之后,細胞就完好如初了。

細胞胞質(zhì)疏松,狀態(tài)不好,養(yǎng)不起來,怎么辦?

 

策略 1:一般情況下,從血清下手就行,要么換好血清,要么提高血清濃度,血清濃度提高到 15%~20% 培養(yǎng) 48 h,換成正常 10% 的濃度,用高濃度的血清培養(yǎng)時間過長對細胞有毒性。

策略 2:血清下手之后可以同時采取提高細胞密度的方法,從培養(yǎng)瓶換到六孔板,12 孔板等,細胞密度大,細胞分泌的細胞因子多,腫瘤細胞通過旁分泌途徑促進細胞生長。

預(yù)防策略:細胞胞質(zhì)疏松,老化的原因在于細胞傳代次數(shù)比較多,胰酶消化時間太長,這時候,一定要控制細胞傳代次數(shù),注意胰酶消化時間,胰酶消化時間過長,容易導(dǎo)致細胞狀態(tài)不佳以及胞質(zhì)疏松。有一招,元元沒試過,可以嘗試,將細胞凍起來,過段時間復(fù)蘇,細胞會長得比較好。

長途運輸過來裝滿培養(yǎng)液的細胞如何處理?

很多人都會遇到從其他地方買來細胞或者快遞運來細胞,裝滿培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶的細胞怎么處理的問題。

第 1 步:先放 37℃ 培養(yǎng)箱放置 4 小時,這樣細胞在通過長途跋涉以后得以穩(wěn)定,觀察細胞狀態(tài)。

第 2 步:將新鮮培養(yǎng)基和舊的培養(yǎng)基 1:1 稀釋,如果細胞狀態(tài)不好,可以將血清濃度提到 15%,否則正常培養(yǎng),這樣有一個過渡期,不至于細胞換血清之后狀態(tài)不佳,15% 的血清培養(yǎng) 48 h 之后換成正常濃度培養(yǎng)。

在线日韩欧美| 熟女乱淫aaaa片久久| 国产乱色精品成人免费视频| 日本高清视频网站www| 久久久久人妻一区二区三区VR| 国产97色| 国产黄片一级| 米奇777四色精品人人爽| 人妻久久无码精品区| 少妇被又大又粗又爽毛片久久黑人| 久久99热狠狠色精品一区| 黑人巨大精品欧美黑寡妇| 狠狠精品久久久无码中文字幕| 无码a级毛片日韩精品| 好吊妞国产欧美日韩免费观看| 婷婷色香合缴缴情AV第三区| 免费人妻精品一区二区三区| 日韩精品在线一区二区| 成人美女黄网站色大色费全看下载| 成人区人妻精品一区二| 黄色性视频| zzzo女人另类性生交| 久久泄欲网| 印度黄色片| 尹人网| 最新亚洲春色av无码专区| 10000部拍拍拍免费视频| 欧美V国产V亚洲V日韩九九| 国产一精品一AV一免费| 国产女人精品视频国产灰线| 成在线人永久免费视频播放| 国产开嫩苞视频在线观看| 欧洲美熟女乱又伦免费视频| 亚洲中文久久精品无码1| 亚洲国产成人欧美在线观看| 日本五月天婷久久网站| 久久精品人人做人人爽爽 | 黑人上司好猛我好爽中文字幕| 色噜噜国产精品视频一区二区| 日韩人妻无码潮喷中文视频| 国产成人亚洲综合色影视|