自拍偷拍一区二区三区,操丝袜丰臀熟女,男女操b做爱视频,熟妇乱精品一区

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  一些常見的限定化學(xué)成分培養(yǎng)基操作介紹

一些常見的限定化學(xué)成分培養(yǎng)基操作介紹

更新時間:2020-11-10  |  點擊率:848
   限定化學(xué)成分培養(yǎng)基是指培養(yǎng)基中的素有成分都是明確的,它同樣不含有動物蛋白,化學(xué)限定培養(yǎng)基同樣也不是添加了植物水解物,而是使用了一些已知結(jié)構(gòu)與功能的小分子化合物,如短肽、植物激素等.這種培養(yǎng)基更有利于分析細(xì)胞的分泌產(chǎn)物.目前已經(jīng)有適合于293細(xì)胞、CHO細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞生長的CDM問世。
  一、常規(guī)培養(yǎng)和傳代
  1)在聚碳酸酯Erlenmeyer搖瓶中預(yù)平衡足量化學(xué)限定培養(yǎng)基1小時。
  2)確定活細(xì)胞密度。
  3)調(diào)整搖瓶工作體積(見英文說明書表2)。
  4)接種細(xì)胞密度為3×105細(xì)胞/ml
  5)5%CO2,37℃培養(yǎng)。
  6)細(xì)胞密度達(dá)到15-40×105細(xì)胞/ml時,進(jìn)行傳代。通常間隔為3-4天。
  7)如果細(xì)胞密度太低,或細(xì)胞在適應(yīng)期不生長,則在4天后進(jìn)行離心,更換培養(yǎng)基。
  對某些細(xì)胞系,無須預(yù)平衡,而2-8℃的培養(yǎng)液效果更好。
  二、從血清到無血清培養(yǎng)的過渡
  1.離心足量細(xì)胞,細(xì)胞懸液密度為4-6×105細(xì)胞/mL,115×g,5分鐘
  2.細(xì)胞在含2%胎牛血清的培養(yǎng)基中重懸培養(yǎng)(必要時含6-8mM谷氨酰胺)。
  3.細(xì)胞每2-4天傳代或更換培養(yǎng)液。
  4.在傳代至少3次后降低血清濃度為0.5%。
  5.細(xì)胞每2-4天傳代或更換培養(yǎng)液。
  6.在2-4代后血清濃度降為0%
  7.繼續(xù)培養(yǎng)直到細(xì)胞存活率>90%
  8.適應(yīng)后的細(xì)胞應(yīng)在化學(xué)限定培養(yǎng)基中以2-5×105細(xì)胞/ml接種。培養(yǎng)的細(xì)胞應(yīng)在每3-4天稀釋一次。由于HEK細(xì)胞容易積聚,培養(yǎng)物應(yīng)攪動或搖晃,采用轉(zhuǎn)瓶或搖瓶系統(tǒng)。
漳州市| 免费一区二区无码东京热| 99精品| 精品人妻少妇嫩草| 浮荡的麻麻让我爽了一夜视频| 大香蕉亚洲| 韩国地线观看一二三四区| 亚洲色欲在线播放一区二区三区| 小蜜桃5| www.奇米| 人妻少妇一区二区| 色综合综合色| 国产自拍偷拍| japanese在线| 国产国语亲子伦亲子| 国产精品美女久久久久久久久| 成年免费A级毛片| 中文文字幕文字幕亚洲色| 久久久久亚洲AV成人人电影软件| 色欲色香天天天综合无码| 国产熟女一区二区三区十视频 | 久久久无码精品亚洲日韩按摩 | 黄片视频在线| 国产成人欧美日本在线观看| 狼友av永久网站免费极品在线| 国产精华av午夜在线观看| 扒开双腿疯狂进出爽爽爽视频| 亚洲区激情区无码区日韩区| 麻豆在线观看| 含羞草蜜桃羞羞久久爱av| 91精品国产闺蜜国产在线闺蜜| 天堂av网站| 日韩A级黄片一区二区| 久久午夜无码鲁丝片| 精品日本一区二区三区在线观看| 精品无码人妻一区二区三区不卡 | 午夜免费啪视频| 偷国产乱人伦偷精品视频| 欧美XXXXX高潮喷水麻豆| 亚洲人成中文字幕在线观看| 四十如虎的丰满熟妇啪啪|