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弧菌顯色培養(yǎng)基配方的選定和制備方法

更新時(shí)間:2018-10-25  |  點(diǎn)擊率:1728
   弧菌顯色培養(yǎng)基配方的選定和制備方法
  
  弧菌顯色培養(yǎng)基用法
  
  稱(chēng)取本品18.46g加入200ml蒸餾水,加熱煮沸溶解并不停攪拌,加熱10-20分鐘。冷卻至45-50℃時(shí),傾入無(wú)菌平皿。
  
  注意:制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥,可在37℃的培養(yǎng)箱中倒置放置1-2小時(shí)。
  
  弧菌顯色培養(yǎng)基操作步驟
  
  1、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液;
  
  2、取1ml樣品液加入9mlSCPB肉湯或堿性蛋白胨水中,37℃增菌培養(yǎng)18-24小時(shí);
  
  3、用3mm接種環(huán)取1環(huán)增菌液,劃線(xiàn)接種到副溶血性弧菌顯色培養(yǎng)基上,做2個(gè)平板;
  
  4、37℃培養(yǎng)18-24h,溶血性弧菌顯藍(lán)色至藍(lán)綠色,霍亂弧菌和其它弧菌顯無(wú)色,其它細(xì)菌顯黃色或無(wú)色且菌落很??;
  
  5、對(duì)可疑菌落可劃線(xiàn)接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上,36±1℃培養(yǎng)12-16小時(shí),挑取單菌落做副溶血性弧菌全套生化試驗(yàn)。
  
  弧菌顯色培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng)
  
  1.弧菌顯色培養(yǎng)基配方的選定
  
  同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別。因此,除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外.一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料.加以比較核對(duì).再依據(jù)自己的使用目的加以選用,記錄其來(lái)源。
  
  2.培養(yǎng)基的制備記錄
  
  每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,包括培養(yǎng)推各稱(chēng),配方及其來(lái)源.和各種成份的牌號(hào)。zui終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制各的日期和制備者等,記錄應(yīng)復(fù)制一份,原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。
  
  3.弧菌顯色培養(yǎng)基成分的稱(chēng)取
  
  培養(yǎng)基的各種成分必須稱(chēng)取并要注意防止錯(cuò)亂.一次完成,不要中斷??蓪⑴浞街糜诎鴤?cè),每稱(chēng)完一種成分即在配方上做出記號(hào),并將所需稱(chēng)取的藥品一次取齊,置于左側(cè),每種稱(chēng)取完畢后,即移放于右側(cè)。*稱(chēng)取完畢后.還應(yīng)進(jìn)行一次檢查。
  
  4.弧菌顯色培養(yǎng)基各成份的混合和溶化
  
  培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,使細(xì)菌不易生長(zhǎng)。使用不銹鋼鍋加熱溶化.也可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng),以防焦化、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,應(yīng)重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分*溶化.迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基,應(yīng)先用一部分水將瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過(guò)程中,因蒸發(fā)而丟失的水分,zui后必須加以補(bǔ)足。
  
  5.培養(yǎng)塞pH的初步調(diào)整
  
  培養(yǎng)基各成分*溶解后,應(yīng)進(jìn)行pH的初步調(diào)正,因培養(yǎng)基在加熱消毒過(guò)程中、pH會(huì)有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH卻會(huì)有顯著的升高。因此,對(duì)這個(gè)步驟,操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn)、以期能掌握培養(yǎng)基的zui終pH,保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)正后,還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。
  
  
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